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澳门大阳城娱乐登入的试验原理及操作步骤
发布时间:2019-10-10 点击量:289
      一、澳门大阳城娱乐登入的实验原理:
  本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中猪弓形虫抗体(Tox-Ab)。用纯化的弓形虫抗体(Tox-Ab)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中弓形虫抗体(Tox-Ab)相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的弓形虫抗体(Tox-Ab)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中弓形虫抗体(Tox-Ab)的存在与否。
  二、澳门大阳城娱乐登入的试验操作步骤:
  1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
  2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  7.温育:操作同3。
  8.洗涤:操作同5。
  9.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
  10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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