澳门大阳城娱乐登入-大阳城娱乐手机版登陆-最全网站

网站首页技术中心 > Super-Bradford蛋白定量试剂盒说明书
产品目录
Super-Bradford蛋白定量试剂盒说明书
发布时间:2020-10-15 点击量:52

  

     Super-Bradford蛋白定量试剂盒说明书

 

Super-BradfordProteinAssayKit                                                       

Super-Bradford 蛋白定量试剂盒说明书

 



Cat.No. K0013                         

 

保存:2-8℃

 

组分说明



 

Catalogno.                                 K0013

KitSize                                800 次/微孔,100 次/试管

BradfordProteinAssayReagent               200ml

BSA 标准液(2mg/ml)                          2ml

 



 

产品简介

 

    Bradford 法是简单和快速的比色蛋白定量方法。这一方法基于考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后,产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在 465-595nm 处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可通过检测 595nm 的光吸收值的大小来计算蛋白的含量。本产品将传统的 Bradford 方法进行了改良,最大限度的加大蛋白定量的线性范围,变异性小于普通考马斯亮蓝染色法,灵敏度范围为 100-1,500 μg/ml。使用本产品反应迅速,颜色产物 1 小时内保持稳定。本试剂盒适用于多种缓冲液系统,不受金属离子、还原剂和螯合剂的干扰。

 

注意事项 

 

 1.  如待测样品中含较多的干扰物质(具体见附表 1),可采用 BCA 蛋白定量试剂盒(K0014)或其他蛋白定量产品。

 

 2.  BSA 标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用 1×PBS 或 0.9%生理盐水进行稀释)。

 

 3.  本试剂盒不适合含有去污剂的蛋白定量,所测蛋白分子量必须大于 3kD。

 

 4.  操作中请佩戴手套。

 

 5.  本产品仅限科研使用。

 



操作步骤(以大肠杆菌表达系统为例)

 

 1.  稀释 BSA 标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释 BSA 标准品。

 

 

                                                

管号    稀释液用量(μl)   BSA标准品用量(μl)    BSA标准品最终浓度(μg/ml)

                                                 

 

A                 0                 100                2,000

B                50                 150                1,500

 

C                200                200                1,000

 

D                200         200(从C管中取)          500

E                200         200(从D管中取)          250

 

F                200         200(从E管中取)           125

G                200                 0                 0(空白)

 

 

 2.  试管检测(检测范围:100-1500 μg/ml)

 

    1)按上表稀释标准品,将 30 μl 稀释好的 BSA 标准品分别加到作好标记的试管中。 

    2)取干净的试管,分别加入 30 μl 待测蛋白样品(原液或稀释液),并作好标记,推荐每个测定做 2-3 个平行反应。

 

    3)向步骤 1)和步骤 2)的试管中各加入 1.5mlBradfordProteinAssayReagent,充分混匀,室温放置 10 分钟。

 

    4)用分光光度计测定 595nm 处的吸光值。

 

    5)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。

 

        注意:数据处理时需要去除明显错误的值。未知样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制得曲线,可以从计算机给出的线性方程式计算出未知样品的浓度。

 

    6)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。

 

 3.  微孔检测(检测范围:100-1500 μg/ml)

 

    1)将按表 1 稀释好的 A-GBSA 标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各 5 μl 分别加到作好标记的 96 孔板微孔中。 

 

    2)每孔加入 250 μlBradfordProteinAssayReagent,充分混匀,盖上 96 孔板盖,室温放置 10 分钟。

 

    4)用酶标仪测定 595nm 处的吸光值。

 

    5)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。

 

        注意:数据处理时需要去除明显错误的值。未知样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制得曲线,可以从计算机给出的线性方程式计算出未知样品的浓度。

 

    6)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。

 

  

 

实验代做服务:

ELISA试剂盒免费代检测

CCK8检测

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫组化IHC染色

荧光定量PCR

动物模型服务

流式细胞检测

免疫荧光染色

激光共聚焦

DNA甲基化实验

石蜡/冰冻切片

透射电镜服务

扫描电镜实验

蛋白双向(2-D)

动物实验

免疫共沉淀

原位杂交(FIsh)

蛋白质纯化

分子克隆和质粒载体构建服务

组蛋白甲基化磷酸化乙酰化

 

蛋白双向2D-WB

 

药理毒理动物实验

 

番红O固绿染色

明胶酶谱MMP

酶活性检测

动物造模/模型实验服务

电话咨询
  • 服务热线:
  • 400-665-0203

沪公网安备 31011802001677号