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B95-8绒猴EBV转化的白细胞
发布时间:2020-06-22 点击量:67

  细胞信息表

 

细胞名称          B95-8绒猴EBV转化的白细胞

种属            绒猴

组织来源          外周血

生长状态          悬浮细胞

培养条件          培养基类型:RPMI1640培养基

              FBS:10%

              抗生素:双抗

              培养条件:37℃,CO2:5%

 

传代方法 收到细胞后,在倒置显微镜下观察细胞生长状态:

如果没长满,将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜

培养液,继续培养。

如果细胞已经长满(约80%-90%)则传代后继续培养。

贴壁细胞传代方法:

1弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),让胰酶与大部分细胞接触

后放入37℃培养箱内,随时观察细胞状态变化,待细胞大部分变

圆后加完全培养基终止消化。

悬浮细胞传代方法:可以直接传代也可以离心法传代。

1直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后,将上清吸掉1/2-2/3,

吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

2离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内,1000rpm, 5分钟,去除上清,加新的培养液到离心管内,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

 一般没有特殊说明,细胞一般是一传二。

冻存方法 

70%完全培养基,20%FBS,10%DMSO,现用现配。

储存:液氮中长期保存。

1观察细胞最hao在低倍镜下观察,便于整体估计细胞密度。

2在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落,可离心吹打后重新种入瓶中培养。

3收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等,请在一周内与我们联系。

 

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